Spektrofotometer dengan a dapat menghasilkan beberapa panjang gelombang sumber cahaya, melalui rangkaian alat spektroskopi, menghasilkan panjang gelombang tertentu dari sumber cahaya, cahaya melalui sampel uji, sebagian cahaya diserap, menghitung nilai absorbansi sampel, yang diubah menjadi konsentrasi sampel. Sampel nilai absorbansi sebanding dengan konsentrasi sampel.
Radiasi cahaya monokromatis melalui bahan yang diuji larutan, jumlah yang diserap oleh bahan dan konsentrasi bahan serta ketebalan lapisan cair sebanding dengan panjang jalur optik, hubungannya adalah sebagai berikut:
A=- lg (I / I).=- lgT=kLc
Jenis: A, untuk absorbansi.
I. Untuk intensitas cahaya insiden;
I untuk transmisi intensitas cahaya;
T untuk transmisi material;
K sebagai koefisien absorpsi molar;
L sedang menganalisis jalur optik fisik, yaitu panjang sisi piringan kolorimetri;
C adalah konsentrasi zat;
Panjang gelombang serapan selektif material cahaya, dan koefisien serapan yang sesuai adalah konstanta material. Ketika zat murni yang diketahui dalam kondisi tertentu tersedia setelah koefisien absorpsi sampel uji dalam kondisi yang sama dengan larutan, ukur absorbansi, dapat dihitung dari jenis sampel uji dalam kandungan bahan. Penyerapan cahaya pada daerah cahaya tampak, selain zat tertentu, banyak juga bahan yang tidak terserap tetapi dapat bergabung dengan pereaksi kromogenik pada kondisi tertentu atau setelah diolah dilakukan pengukuran warnanya kembali, sehingga disebut juga dengan analisis kolorimetri. Sebagai faktor kromogenik mempengaruhi kedalaman warna lebih, ketika miskin dan sering menggunakan instrumen kemurnian cahaya monokromatik, sehingga penentuan penerapan bahan standar dan bahan referensi pada saat yang sama.
