Sterilisasi autoklaf melibatkan tiga tahap berbeda:
Penghapusan Udara: Pada tahap awal ini, autoklaf menghilangkan udara dari ruangan. Pompa vakum menyedot udara, menciptakan lingkungan bertekanan rendah. Langkah ini memastikan uap dapat menembus seluruh area secara efektif dan mencapai beban untuk sterilisasi yang tepat.
Sterilisasi: Setelah udara dihilangkan, suhu di dalam autoklaf mencapai tingkat yang tepat. Uap jenuh, yang dihasilkan di bawah tekanan, membunuh bakteri, virus, dan mikroorganisme lainnya. Suhu biasa untuk sterilisasi adalah 121 derajat pada tekanan 1,1 kilogram/sentimeter persegi (kg/cm²) (setara dengan 15 pon/inci persegi (lb/in²)). Durasi autoklaf bervariasi bergantung pada volume muatan namun umumnya dianggap 15-20 menit.
Pendinginan/Pengeringan: Setelah sterilisasi, uap dilepaskan, dan autoklaf menjadi dingin. Setelah suhu aman, pintu dibuka dan barang-barang yang disterilkan siap digunakan.
Penghilangan udara yang efektif, penempatan barang yang tepat, dan waktu pemanasan yang memadai sangat penting untuk keberhasilan sterilisasi autoklaf.